一、 产品简介与概述
STEM-CELLBANKER® GMP grade 是一款专为人类胚胎干细胞（hESC）、诱导多能干细胞（iPSC）、间充质干细胞（MSC）以及其他珍贵细胞和组织冻存而设计的化学成分明确（Chemically Defined）、无血清、无动物源成分（Xeno-Free）的高端细胞冷冻保存液。
该产品所有成分均符合美国药典（USP）、欧洲药典（EP）或日本药典（JP）标准，采用预配制即用型设计。它不仅能显著提高干细胞复苏后的存活率，还能完整保留干细胞的多能性、正常染色体核型及分化潜能。
- 产品名称：STEM-CELLBANKER® GMP grade (Chemically defined cryopreservation solution)
- 生产商：ZENOGEN PHARMA CO., LTD.（日本）
- 包装规格：20 ml/瓶、100 ml/瓶
- 质量管理：在符合 JP、EU、US 及 PIC/S GMP 指导方针的设施中生产，质量控制严格符合日本 JP GMP 标准。
- 全球 Master File (MF) 备案：
- 美国 FDA：2013 年在 CBER 完成 Master File 备案（BBMF）。
- 日本 PMDA：2013 年在 PMDA 完成 Master File 备案。
二、 核心竞争优势
- 高复苏品质与干细胞特性维持：
- 显著提升细胞复苏存活率。
- 完全维持干细胞的多能性（Pluripotency）、正常核型（Normal Karyotype）及增殖能力。
- 支持生物组织块冻存：
- 可用于器官或组织块的冷冻保存，解冻后对细胞 DNA 和 RNA 表达无损伤，维持转录组稳定性。
- 安全与批次稳定性：
- 100% 药典级化学合成成分，彻底排除动物源病原体污染风险，批间一致性极高。
- 极简便捷（Save Time & Cost）**：
- 预配制即用型，无需昂贵的程序降温仪，细胞悬液重悬后可直接放入 -80℃ 冰箱进行冻存。
三、 权威机构与实验室验证数据
1. 人胚胎干细胞 (hESC) 与人 iPSC 验证
- 验证机构：瑞典卡罗林斯卡学院（Karolinska Institutet）临床科学系
- 测试株系：hESC（HS293, HS306）、人 iPSC（ChiPSA）
- 结论：与传统冻存液（10% DMSO + 含血清替代物的培养基）相比，STEM-CELLBANKER® 组的细胞复苏存活率显著提升，且完全维持了多能性 marker 表达、正常染色体核型及增殖能力。
2. 间充质干细胞 (MSC) 与内皮祖细胞 (EPC) 验证
- 验证机构：日本筑波大学（University of Tsukuba）再生医学系
- 测试细胞：人脐带血来源 MSCs 及 EPCs
- 方案与结论：直接在 -80℃ 冻存 3 天后转入 -192℃ 保存 72 天。复苏后 MSCs 存活率 ≥ 95%，EPCs 存活率 ≥ 90%，细胞的多能性与分化能力完好。
3. 动物组织块冷冻保存验证
- 验证团队：ZENOAQ 细胞工程团队
- 测试对象：小鼠肾脏及多种器官组织块（约 5mm 见方）
- 结论：在 -80℃ 冻存 1 周后解冻，进行 H&E 染色与 Active Caspase-3 免疫组化染色，结果显示坏死与细胞凋亡信号与新鲜组织无异，证明其具备优秀的组织级保护效果。
4. mRNA 转录组表达稳定性验证
- 验证团队：ZENOAQ 细胞工程团队
- 测试对象：小鼠肺成纤维细胞
- 结论：对比新鲜细胞与冻存解冻细胞的 DNA 微阵列芯片分析，93% 的 mRNA 表达差异控制在 ±1.6 倍以内，转录组高度稳定。
四、 适用范围 (Application Scope)
- 多能干细胞：人类胚胎干细胞（hESC）、人诱导多能干细胞（hiPSC）。
- 成体干细胞/祖细胞：间充质干细胞（MSCs，如骨髓、脐带、脂肪来源）、内皮祖细胞（EPCs）等。
- 原代与高价值细胞：原代人肝细胞（Hepatocyte）、肝星状细胞、淋巴细胞等。
- 生物组织：脐带组织、器官组织块等。
五、 标准操作规程 (Application Protocol)
1. 细胞冻存步骤 (Freezing)
- 准备细胞：选择处于对数生长期、状态良好的细胞，测定细胞计数与活率。
- 离心收集：在 4℃ 下 1,000 ~ 2,000 rpm 离心 3~5 分钟，小心吸弃上清液。
- 加入冻存液：加入 STEM-CELLBANKER® 轻轻重悬细胞，调整密度至 5×10⁵ ~ 5×10⁶ cells/mL。
- 分装：按每管 1mL 分装至已标注细胞信息的冻存管中。
- 冷冻保存：将冻存管直接放入 -80℃ 冰箱。24 小时后可转入液氮罐（-196℃）保存。
2. 细胞复苏步骤 (Thawing)
- 快速融化：取出冻存管，置于 37℃ 水浴中摇晃快速融化。
- 稀释洗涤：将 1mL 细胞悬液加入 10mL 完全培养基中轻柔混匀。
- 离心弃液：离心（1,000 ~ 2,000 rpm，3~5 分钟），吸弃上清。
- 培养：用适量完全培养基重悬细胞，接种于培养瓶中按常规步骤培养。
六、 储存条件与有效期
- 储存温度：2℃ 至 8℃ 冷藏保存，或低于 -20℃ 冷冻保存。
- 有效期：未开封并在 2–8℃ 条件下，自生产之日起保质期为 3 年。
